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Introduzione Come registrarsi Ordina Oligo Ordina Sequenze Come effettuare un ordine on-line Come controllare l'ordine Preparazione e spedizione dei campioni

Preparazione e spedizione dei campioni

Spedizione dei campioni

Spedire i campioni ai seguenti indirizzi:

Eurofins MWG Operon/M-Medical Srl
c/o Regus
Via Senigallia 18/2 - Torre A
20161 Milano
Italia

oppure a vostra discrezione:

Eurofins MWG Operon
Anzinger Str. 7a
85560 Ebersberg
Germania

IMPORTANTE Fare sempre l’ordine on-line contestualmente all’invio dei campioni 

Preparazione dei campioni

Servizio VALUE Read ® in tubi e in piastre

  • E’ possibile inviare una coltura stabile o uno stock di glicerolo contente il clone selezionato di E.coli, oppure il plasmide purificato o il prodotto di PCR purificato o non purificato. (Vedi listino per i prezzi aggiuntivi per le purificazioni dei campioni).
  • Per cortesia utilizzare per i DNA templato e i primer tubi da 1.5 ml, o piastre microtiter da 96 pozzetti , senza l’uso di parafilm.
  • Per i campioni in tubi singoli raccomandiamo di spedire il DNA risospeso in acqua bidistillata o in 5 mM di Tris-HCl (pH 8.0-9.0), senza l’uso di parafilm.
  • Le piastre possono contenere un mix di plasmidi e di prodotti di PCR, se non è necessaria la purificazione.
  • Per ottenere risultati ottimali, la concentrazione/quantità di campione dovrebbe essere normalizzata lungo la piastra.
  • I primer possono essere spediti in una piastra separata seguendo il layout della piastra dei campioni.
  • La posizione H12 della piastra dovrebbe essere tenuta libera per un controllo qualità interno (opzionale).
Concentrazioni

DNA Plasmidico purificato

50-100 ngr/µl in un volume minimo di 15 µl (quantità totale 750-1500 ngr)

Prodotto di PCR purificato

Dimensione Quantità Vol. min. Quantità Tot.
<300 bp 2 ngr/µl 15 µl 30 ngr
300-1000 bp 5 ngr/µl 15 µl 75 ngr
>1000 bp 10 ngr/µl 15 µl 150 ngr

Nota: le quantità vanno raddoppiate per prodotti NON purificati

Primer

Quantità Vol. min. Quantità Tot.
2 pmol/µl 15 µl 30 pmol

Nota: la quantità descritta è per una reazione di sequenza.

Campioni premixed in tubi o piastre

DNA plasmidico purificato:

Quantità Vol. tot.
50-100 ng/µl 15 µl + 15 pmol di primer

Prodotto di PCR purificato:

Dimensione Quantità Vol. min.
<300 bp 2 ng/µl 15 µl + 15 pmol di primer
300-1000 bp 5 ng/µl 15 µl + 15 pmol di primer
>1000 bp 10 ng/µl 15 µl + 15 pmol di primer

Servizio Ready to Load in tubi o in piastre

  • Per cortesia utilizzare tubi da 1.5 ml o piastre microtiter da 96 pozzetti.
  • Per cortesia utilizzare ABI Big Dye Terminator kit (v.3.1).
  • Il volume dei Big dye non deve eccedere 1 µl/reazione.
  • Volume di reazione totale: 10 µl o 20 µl.
  • La spedizione dei campioni in ghiaccio secco è fortemente raccomandata. 

Servizio a la Carte personalizzato

  • E’ possibile inviare una coltura stabile o uno stock di glicerolo contenete il clone selezionato di E.coli, oppure il plasmide purificato o il prodotto di PCR purificato o non purificato. (Vedi listino per i prezzi aggiuntivi per le purificazioni dei campioni).
  • Per cortesia utilizzare tubi da 1.5 ml per i DNA templato e i primer , senza ulteriore parafilm.
  • Raccomandiamo di spedire il DNA risospeso in acqua bidistillata o in 5mM di Tris-HCl (pH8.0-9.0), senza l’uso di parafilm.
Concentrazioni

DNA Plasmidico purificato

50-100 ng/ µl, minimo 1 µg/reazione.

Le quantità di plasmide vanno raddoppiate per campioni con forcine o strutture secondarie, con alto contenuto in GC o altre regioni difficili.

BAC-, PAC-, Cosmidi-, Fosmidi-DNA

200-1000 ng/µl, minimo 4 µg/reazione.

Prodotto di PCR purificato

Dimensione Quantità Vol. min.
<300 bp 2 ng/µl 15 µl
300-1000 bp 5 ng/µl 15 µl
>1000 bp 10 ng/µl 15 µl

Nota: le quantità vanno raddoppiate per prodotti NON purificati.

DNA Genomico

5-50 ng/ul, minimo 200 ng/reazione

Primer

2 pmol/ul, volume minimo totale 15 ul (che corrisponde quindi ad una quantità di 30 pmoli)

Nota: la quantità descritta è per una reazione di sequenza

Walking Services

  • E’ possibile inviare una coltura stabile o uno stock di glicerolo contenente il clone selezionato di E.coli,oppure il plasmide purificato o il prodotto di PCR purificato o non purificato. (Vedi listino per i prezzi aggiuntivi per le purificazioni dei campioni)
  • Per cortesia utilizzare per il DNA templato tubi da 1.5 ml.
  • Se disponibile, per favore inviate una sequenza di riferimento a sequencinglab@mwgdna.com e in copia a oligo@mmedical.dgroup.it
Concentrazioni

Concentrazione minima: 50-100 ng/ µl per plasmidi, 2-10 ngr/µl per prodotti PCR

Quantità totale minima:

  • Sequenziamento Single strand: 1 µg /1kb di inserto o 100 ngr/1Kb di prodotto PCR.
  • Sequenziamento Double strand: 2 µg /1kb di inserto o 200 ngr/1Kb di prodotto PCR.

Sequenziamento GLP Compliant

  • E’ possibile inviare una coltura stabile o uno stock di glicerolo contenete il clone selezionato di E.coli, oppure il plasmide purificato o il prodotto di PCR purificato o non purificato. (Vedi listino per i prezzi aggiuntivi per le purificazioni dei campioni).
  • Per cortesia utilizzare per il DNA templato tubi da 1.5 ml. 
  • Se disponibile, per favore inviate una sequenza di riferimento a sequencinglab@mwgdna.com e in copia a oligo@mmedical.dgroup.it
Concentrazioni

Concentrazione minima: 50-100 ng/µl 

Quantità totale minima:

  • per un coverage 2x: 2 µg/1Kb inserto o 300 ngr/1kb di prodotto PCR.
  • per un coverage 4x: 4 µg/1Kb inserto o 600 ngr/1kb di prodotto PCR.