Spedizione dei campioni
Spedire i campioni ai seguenti indirizzi:
Eurofins MWG Operon/M-Medical Srl
c/o Regus
Via Senigallia 18/2 - Torre A
20161 Milano
Italia
oppure a vostra discrezione:
Eurofins MWG Operon
Anzinger Str. 7a
85560 Ebersberg
Germania
IMPORTANTE Fare sempre l’ordine on-line contestualmente all’invio dei campioni
Preparazione dei campioni
Servizio VALUE Read ® in tubi e in piastre
- E’ possibile inviare una coltura stabile o uno stock di glicerolo contente il clone selezionato di E.coli, oppure il plasmide purificato o il prodotto di PCR purificato o non purificato. (Vedi listino per i prezzi aggiuntivi per le purificazioni dei campioni).
- Per cortesia utilizzare per i DNA templato e i primer tubi da 1.5 ml, o piastre microtiter da 96 pozzetti , senza l’uso di parafilm.
- Per i campioni in tubi singoli raccomandiamo di spedire il DNA risospeso in acqua bidistillata o in 5 mM di Tris-HCl (pH 8.0-9.0), senza l’uso di parafilm.
- Le piastre possono contenere un mix di plasmidi e di prodotti di PCR, se non è necessaria la purificazione.
- Per ottenere risultati ottimali, la concentrazione/quantità di campione dovrebbe essere normalizzata lungo la piastra.
- I primer possono essere spediti in una piastra separata seguendo il layout della piastra dei campioni.
- La posizione H12 della piastra dovrebbe essere tenuta libera per un controllo qualità interno (opzionale).
Concentrazioni
DNA Plasmidico purificato
50-100 ngr/µl in un volume minimo di 15 µl (quantità totale 750-1500 ngr)
Prodotto di PCR purificato
| Dimensione |
Quantità |
Vol. min. |
Quantità Tot. |
| <300 bp |
2 ngr/µl |
15 µl |
30 ngr |
| 300-1000 bp |
5 ngr/µl |
15 µl |
75 ngr |
| >1000 bp |
10 ngr/µl |
15 µl |
150 ngr |
Nota: le quantità vanno raddoppiate per prodotti NON purificati
Primer
| Quantità |
Vol. min. |
Quantità Tot. |
| 2 pmol/µl |
15 µl |
30 pmol |
Nota: la quantità descritta è per una reazione di sequenza.
Campioni premixed in tubi o piastre
DNA plasmidico purificato:
| Quantità |
Vol. tot. |
| 50-100 ng/µl |
15 µl + 15 pmol di primer |
Prodotto di PCR purificato:
| Dimensione |
Quantità |
Vol. min. |
| <300 bp |
2 ng/µl |
15 µl + 15 pmol di primer |
| 300-1000 bp |
5 ng/µl |
15 µl + 15 pmol di primer |
| >1000 bp |
10 ng/µl |
15 µl + 15 pmol di primer |
Servizio Ready to Load in tubi o in piastre
- Per cortesia utilizzare tubi da 1.5 ml o piastre microtiter da 96 pozzetti.
- Per cortesia utilizzare ABI Big Dye Terminator kit (v.3.1).
- Il volume dei Big dye non deve eccedere 1 µl/reazione.
- Volume di reazione totale: 10 µl o 20 µl.
- La spedizione dei campioni in ghiaccio secco è fortemente raccomandata.
Servizio a la Carte personalizzato
- E’ possibile inviare una coltura stabile o uno stock di glicerolo contenete il clone selezionato di E.coli, oppure il plasmide purificato o il prodotto di PCR purificato o non purificato. (Vedi listino per i prezzi aggiuntivi per le purificazioni dei campioni).
- Per cortesia utilizzare tubi da 1.5 ml per i DNA templato e i primer , senza ulteriore parafilm.
- Raccomandiamo di spedire il DNA risospeso in acqua bidistillata o in 5mM di Tris-HCl (pH8.0-9.0), senza l’uso di parafilm.
Concentrazioni
DNA Plasmidico purificato
50-100 ng/ µl, minimo 1 µg/reazione.
Le quantità di plasmide vanno raddoppiate per campioni con forcine o strutture secondarie, con alto contenuto in GC o altre regioni difficili.
BAC-, PAC-, Cosmidi-, Fosmidi-DNA
200-1000 ng/µl, minimo 4 µg/reazione.
Prodotto di PCR purificato
| Dimensione |
Quantità |
Vol. min. |
| <300 bp |
2 ng/µl |
15 µl |
| 300-1000 bp |
5 ng/µl |
15 µl |
| >1000 bp |
10 ng/µl |
15 µl |
Nota: le quantità vanno raddoppiate per prodotti NON purificati.
DNA Genomico
5-50 ng/ul, minimo 200 ng/reazione
Primer
2 pmol/ul, volume minimo totale 15 ul (che corrisponde quindi ad una quantità di 30 pmoli)
Nota: la quantità descritta è per una reazione di sequenza
Walking Services
- E’ possibile inviare una coltura stabile o uno stock di glicerolo contenente il clone selezionato di E.coli,oppure il plasmide purificato o il prodotto di PCR purificato o non purificato. (Vedi listino per i prezzi aggiuntivi per le purificazioni dei campioni)
- Per cortesia utilizzare per il DNA templato tubi da 1.5 ml.
- Se disponibile, per favore inviate una sequenza di riferimento a sequencinglab@mwgdna.com e in copia a oligo@mmedical.dgroup.it
Concentrazioni
Concentrazione minima: 50-100 ng/ µl per plasmidi, 2-10 ngr/µl per prodotti PCR
Quantità totale minima:
- Sequenziamento Single strand: 1 µg /1kb di inserto o 100 ngr/1Kb di prodotto PCR.
- Sequenziamento Double strand: 2 µg /1kb di inserto o 200 ngr/1Kb di prodotto PCR.
Sequenziamento GLP Compliant
- E’ possibile inviare una coltura stabile o uno stock di glicerolo contenete il clone selezionato di E.coli, oppure il plasmide purificato o il prodotto di PCR purificato o non purificato. (Vedi listino per i prezzi aggiuntivi per le purificazioni dei campioni).
- Per cortesia utilizzare per il DNA templato tubi da 1.5 ml.
- Se disponibile, per favore inviate una sequenza di riferimento a sequencinglab@mwgdna.com e in copia a oligo@mmedical.dgroup.it
Concentrazioni
Concentrazione minima: 50-100 ng/µl
Quantità totale minima:
- per un coverage 2x: 2 µg/1Kb inserto o 300 ngr/1kb di prodotto PCR.
- per un coverage 4x: 4 µg/1Kb inserto o 600 ngr/1kb di prodotto PCR.
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